Bst 4.0 HNB Bead試劑為全組分凍干品試劑，包含了標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)緩沖液、

HNB 染料、Mg2+、dNTP、Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶等，

使用時(shí)只需要加入引物、模板即可進(jìn)行核酸恒溫?cái)U(kuò)增。

Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶具有依賴(lài)于 RNA 模板的聚合酶

活性（逆轉(zhuǎn)錄），還具有依賴(lài)于 DNA 的聚合酶活性，因此

無(wú)論 DNA 或 RNA 樣本均可使用該制品進(jìn)行高效的恒溫

擴(kuò)增。該制品是進(jìn)行 LAMP 及 RT-LAMP 擴(kuò)增反應(yīng)的

試劑。優(yōu)化的反應(yīng)體系，確?？焖俚耐瓿蓹z測(cè)試劑的反應(yīng)

體系建立。

在 LAMP 擴(kuò)增起始前 HNB 染料與 Mg2+結(jié)合表現(xiàn)出

肉眼可見(jiàn)的紫羅蘭色，當(dāng)陽(yáng)性擴(kuò)增發(fā)生時(shí) Mg2+被 LAMP

反應(yīng)的副產(chǎn)物焦磷酸螯合，HNB 染料無(wú)法與 Mg2+結(jié)合表

現(xiàn)出肉眼可見(jiàn)的天藍(lán)色。由此判斷天藍(lán)色為陽(yáng)性擴(kuò)增。該

顯色方法受樣本緩沖鹽、pH 等影響較小，適用的樣本較

pH 顯色法通用性更強(qiáng)。

貨 號(hào) 名 稱(chēng) 規(guī)格

A3828-04 Bst4.0 HNB Bead 100 個(gè)

儲(chǔ)存：-20℃保存 2 年；室溫（25℃）保存>6 個(gè)月。

使用凍干微球進(jìn)行全擴(kuò)增體系用品的制備方法：將優(yōu)化的

擴(kuò)增引物分裝于 0.2 ml EP 管底部，于 70-80℃條件烘干

1-2h。烘干后的 0.2 ml EP 管已經(jīng)含有干燥的擴(kuò)增引物，

再加入一粒凍干微球即可制備成全擴(kuò)增體系干燥品，該干

燥品無(wú)需冷鏈運(yùn)輸，可長(zhǎng)期保存。

反應(yīng)體系說(shuō)明：每一個(gè)凍干微球?yàn)榘凑?25 μl 反應(yīng)體系建

立，在使用時(shí)只需要加入 25 μl 的 ddH2O 或模板即可進(jìn)

行反應(yīng)。

使用實(shí)例：

1. 配制反應(yīng)體系

在 0.2 ml EP 反應(yīng)管中加入下述試劑

Bst4.0 HNB Bead 1 粒

10xLAMP Primer Mix 2.5 μl

模板 DNA/RNA X μl

ddH2O 到液體總量 25 μl

10xLAMP Primer Mix 濃度：FIP/BIP 分別為 16 μM、

LoopF/B 分別為 8 μM、F3/B3 分別為 2 μM

2. 反應(yīng)體系配好后，置于65°C進(jìn)行反應(yīng)25~45min。肉

眼觀察結(jié)果，天藍(lán)色為陽(yáng)性，紫羅蘭色為陰性。

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