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Bst 4.0 SYBR Green Bead試劑

簡要描述:Bst 4.0 SYBR Green Bead試劑,雅吉生物是一家生物企業(yè)主營ATCC細胞,細胞系,原代細胞和培養(yǎng)試劑,重組蛋白,ELISA試劑盒、抗體、熒光定量PCR檢測試劑盒

  • 產(chǎn)品型號:A3828-03
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2024-10-31
  • 訪  問  量:438

詳細介紹

Bst 4.0 SYBR Green Bead試劑該制品為全體系凍干微球制品,內(nèi)含恒溫擴增所用

的反應緩沖液、SYBR Green 熒光染料、Mg

2+、dNTP、

Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶等,使用時只需要加入引物、

模板即可進行核酸恒溫擴增。Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶

具有依賴于 RNA 模板的聚合酶活性(逆轉(zhuǎn)錄),還具有依

賴于 DNA 的聚合酶活性,因此無論 DNA 或 RNA 樣本均

可使用該制品進行恒溫擴增。該制品是進行 LAMP 及

RT-LAMP 擴增反應的試劑。

SYBR Green 系列產(chǎn)品為實時熒光檢測的專用試劑,

可直接在恒溫熒光儀或定量 PCR 以上進行 LAMP 反應擴

增。

貨 號 名 稱 規(guī)格

A3828-03 Bst 4.0 SG Bead 100 個

儲存:-20℃保存 2 年;室溫(25℃)保存>6 個月。

使用凍干微球進行全擴增體系用品的制備方法:將優(yōu)化的

擴增引物分裝于 0.2 ml EP 管底部,于 70-80℃條件烘干

1-2h。烘干后的 0.2 ml EP 管已經(jīng)含有干燥的擴增引物,

再加入一粒凍干微球即可制備成全擴增體系干燥品,該干

燥品無需冷鏈運輸,可長期保存。

反應體系說明:每一個凍干微球為按照 25 μl 反應體系建

立,在使用時只需要加入 25 μl 的 ddH2O 或模板即可進

行反應。

使用實例,進行 LAMP 熒光擴增

1. 配制熒光 LAMP 反應體系

在 0.2 ml EP 反應管中加入下述試劑

Bst 4.0 SG Bead 1 粒

10xLAMP Primer Mix 2.5 μl

模板 DNA/RNA X μl

ddH2O 到液體總量 25 μl

10xLAMP Primer Mix 濃度:FIP/BIP 分別為 16 μM、

LoopF/B 分別為 4-8 μM、F3/B3 分別為 2 μM。

2. 反應體系配好后,置于熒光定量 PCR 儀中于 65°C

進行反應 15~30min。1min 收集一次熒光信號。讀取擴增

曲線進行陰性和陽性判讀。

3. 根據(jù)熒光擴增曲線判讀陽性和陰性。

注意事項:

(1)關于礦物油的使用,在配制完 LAMP 反應體系后,

可加入一滴礦物油覆蓋于反應液上部,可以有效的減少氣

溶膠的污染。實驗證明礦物油并不影響機器的熒光數(shù)值讀

取。

(2)關于擴增曲線的異常:由于 LAMP 擴增速度較快,

熒光信號讀取可能存在矯正計算問題,這與熒光設備的軟

件算法有管。在有些熒光 PCR 儀上,在相對熒光模式下,

表現(xiàn)出曲線飛峰、終點曲線下降的問題。此時調(diào)整到原始

熒光值模式下觀察結(jié)果,或致電相應設備供應商進行咨

詢。

微信圖片_20210909182641.jpg

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