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ATCC細(xì)胞與細(xì)胞系有什么區(qū)別?

更新時(shí)間:2025-06-16      點(diǎn)擊次數(shù):16
  ATCC細(xì)胞培養(yǎng)也叫初代培養(yǎng),是建立細(xì)胞系的關(guān)鍵一步,其步驟包括取材→分離→培養(yǎng)和維持,為了讓新手能更好地了解它,下面我們來解答一些常見的問題。
  1、ATCC細(xì)胞與細(xì)胞系有什么區(qū)別?
  根據(jù)傳統(tǒng)定義,自組織一開始收獲和接種的細(xì)胞被稱為ATCC細(xì)胞,這類細(xì)胞直接從組織分離,生命周期有限,經(jīng)數(shù)次傳代后會逐漸停止生長。ATCC細(xì)胞在有限的生命周期內(nèi)需掌握好細(xì)胞的較大生長空間,以保持細(xì)胞群中基因型和表型的一致性。
  細(xì)胞系是不斷生長、分化的細(xì)胞群,因其經(jīng)過遺傳改造,致使其具有無限增長的潛能。體外生長的細(xì)胞系用于醫(yī)療或科研。
  但實(shí)際上,經(jīng)過長時(shí)間、連續(xù)的傳代培養(yǎng)后,細(xì)胞系隨著代數(shù)的增加,細(xì)胞的基因型和表型都有可能發(fā)生改變。
  需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群,除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
  2、倍增和代數(shù)有什么區(qū)別?
  倍增是培養(yǎng)物中細(xì)胞總數(shù)的翻倍,通常是指細(xì)胞指數(shù)或?qū)?shù)生長期。代數(shù)是指細(xì)胞群從培養(yǎng)瓶中移出,傳代培養(yǎng)過程的次數(shù),傳代培養(yǎng)的目的,是使細(xì)胞處于低密度以刺激其進(jìn)一步生長。
  3、接收到的凍存細(xì)胞該如何處理?
  收到包裝箱后,立即將凍存細(xì)胞從干冰移入液氮中凍存。此過程盡量快,以避免升溫。不要將細(xì)胞儲存在-80℃,這樣會對細(xì)胞造成不可挽回的傷害。
  4、凍存的細(xì)胞該如何開始培養(yǎng)?
  (1)將一管細(xì)胞從液氮罐中取出,注意保護(hù)手和眼睛。
  (2)將凍存管快速的放入37℃水浴中,輕輕握住并旋轉(zhuǎn),直到管內(nèi)物體*融化。
  (3)將凍存管立即從水浴中拿出,擦干,轉(zhuǎn)入無菌環(huán)境。
  (4)用70%的酒精沖洗凍存管,然后擦去多余酒精。
  (5)打開蓋子,注意手指不要碰到里面的螺紋(注意,由于凍存管有負(fù)壓,開蓋時(shí)可能會有少量溢出,這是正?,F(xiàn)象)。
  (6)用多聚賴氨酸(或參照說明書)包被培養(yǎng)瓶。多數(shù)細(xì)胞推薦的接種密度為每平方厘米5000個(gè)細(xì)胞。
  (7)蓋好培養(yǎng)瓶的蓋子,輕輕搖晃培養(yǎng)瓶以使細(xì)胞分布均勻。若需要?dú)怏w交換可打開蓋子。
  (8)將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中(37℃,5%CO2,95%空氣)
  (9)放入培養(yǎng)箱后第6-16小時(shí)更換一次培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細(xì)胞。
  5、細(xì)胞培養(yǎng)過程中,多久更換一次培養(yǎng)基?
  這取決于細(xì)胞生長的速度。一般而言2-3天更換一次培養(yǎng)基,許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
  注意:凍存細(xì)胞復(fù)蘇后,在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡的細(xì)胞。
  6、我能擴(kuò)增培養(yǎng)和再次凍存原代正常人類細(xì)胞嗎?
  這取決于細(xì)胞的類型。一些細(xì)胞類型像神經(jīng)細(xì)胞,神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和一些生長緩慢的上皮細(xì)胞,不推薦擴(kuò)增培養(yǎng)和再次凍存。其它的細(xì)胞類型像成纖維細(xì)胞、星形細(xì)胞、腎系膜細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞等等,可以擴(kuò)增培養(yǎng)和再次凍存。
  然而,需要注意的是再次凍存的過程可能導(dǎo)致細(xì)胞生長性能的改變。
  7、培養(yǎng)瓶中應(yīng)該加入多少體積的培養(yǎng)基?
  我們推薦的用量為:T-25培養(yǎng)瓶5ml,T-75培養(yǎng)瓶15ml,T-150培養(yǎng)瓶30ml。
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