
小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)原代培養(yǎng)在生命科學(xué)研究中用途廣泛,主要包括以下幾個方向:
細胞保種與細胞庫建立
原代MEF可作為細胞保種體系,用于長期保存細胞株并在需要時復(fù)蘇,保證實驗材料的穩(wěn)定性和可重復(fù)性。
胚胎干細胞(ES)/誘導(dǎo)多能干細胞(iPSC)飼養(yǎng)層
MEF能夠分泌多種維持多能性的生長因子,并提供細胞基質(zhì),常被用作ES或iPSC的飼養(yǎng)層,以維持其未分化狀態(tài)和自我更新能力。
基因功能與基因編輯研究
通過轉(zhuǎn)染、CRISPR/Cas9等技術(shù),MEF可用于驗證基因敲除、過表達或突變的功能,幫助構(gòu)建轉(zhuǎn)基因小鼠模型或解析信號通路。
分子生物學(xué)實驗平臺
由于MEF易于轉(zhuǎn)染且增殖快,常用于報告基因、熒光標記、蛋白相互作用、信號通路活性等分子實驗的檢測。
基因治療相關(guān)研究
MEF可作為病毒包裝細胞(如慢病毒、腺病毒)或基因遞送系統(tǒng)的生產(chǎn)平臺,為基因治療載體的制備提供原料。
藥物篩選與毒理學(xué)評估
通過在MEF上進行化合物處理或共培養(yǎng)模型(如免疫細胞、腫瘤細胞),可評估藥物的細胞毒性、代謝活性及作用機制。
細胞老化與衰老機制研究
原代MEF的有限增殖特性使其成為研究細胞衰老、復(fù)制極限及相關(guān)分子標記的理想模型。
共培養(yǎng)模型
將MEF與其他細胞類型(如神經(jīng)元、心肌細胞)共培養(yǎng),可模擬組織微環(huán)境,研究細胞間相互作用和信號傳遞。
其他應(yīng)用
作為轉(zhuǎn)基因小鼠的飼養(yǎng)層細胞,支持胚胎移植和胚胎發(fā)育研究。
用于高通量篩選平臺,結(jié)合自動化培養(yǎng)系統(tǒng)進行大規(guī)模實驗。
綜上,MEF原代培養(yǎng)因其易獲取、增殖活躍、能夠提供天然細胞基質(zhì)和分泌多種生長因子,已成為細胞生物學(xué)、干細胞學(xué)、基因工程、藥物研發(fā)等多個研究領(lǐng)域的基礎(chǔ)工具。
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