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紅細(xì)胞滲透脆性檢測試劑盒(Parpart比色法)操作步驟

更新時間:2024-04-17      點擊次數(shù):566

紅細(xì)胞滲透脆性檢測試劑盒(Parpart比色法)

 

 

產(chǎn)品簡介:

紅細(xì)胞(Red blood cell,RBC)也稱紅血球,是血液中數(shù)量最多的一種血細(xì)胞,脊椎動物體內(nèi)通過RBC運(yùn)送氧氣,RBC同時還具有免疫功能,在貧血檢查中可通過紅細(xì)胞滲透脆性試驗來檢測紅細(xì)胞膜的缺陷。

雅吉生物紅細(xì)胞滲透脆性檢測試劑盒(Parpart比色法)(Erythrocyte Osmotic FragilityAssay Kit)采用Parpart法,又稱光電比色法,其檢測原理是紅細(xì)胞懸浮于等滲鹽水中能夠保持雙面凹盤狀態(tài),如果滲透壓增高,紅細(xì)胞水分會滲出細(xì)胞外而呈現(xiàn)皺縮,如果滲透壓降低,則水分會滲入細(xì)胞內(nèi),使紅細(xì)胞膨脹以致破裂、溶血,利用這一原理將紅細(xì)胞加至一系列的不同濃度的低滲鹽水中,檢查溶血程度,以便判斷紅細(xì)胞抵抗低滲溶液的能力,該實驗被稱為紅細(xì)胞滲透脆性試驗,主要用于檢測人、動物血液的紅細(xì)胞滲透脆性。

 該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。

 

產(chǎn)品組成:

名稱

100T

Storage

試劑(A):Parpart NaCl Solution

30ml

4℃

試劑(B):ddH2O

500ml

RT

 

自備材料:

1、小試管

2、分光光度計

 

操作步驟(僅供參考):

1、配制Parpart NaCl工作液∶按照Parpart NaCl Solution :ddH2O=1:9的比例配制

適量的Parpart NaCl工作液。

2、無菌采血,制成肝素抗凝血或脫纖維血,充分混勻待用。

3、取小試管或恰當(dāng)容器,依次編號,按照Parpart NaCI稀釋表依次加入Parpart NaCl

工作液和ddH2O,即為Parpart NaCI稀釋液,其總體積為4ml,每次檢查應(yīng)設(shè)正常對照。

4、分別吸取40ul肝素抗凝血或脫纖維血加入上述Parpart NaCl稀釋液中,立即混勻,

室溫(20~30℃)靜置30min。

5、將各管離心沉淀5min,取上清液。

6、用分光光度計檢測540nm 波長或綠色濾片比色,以含8.5g/L NaCI的一管(第3管)上

清液作為空白管調(diào)零以含1g/L NaCI的一管(第17管或以ddH2O代替Parpart NaCl稀釋液,加入40微升血液)作為100%溶血管,并計算溶血百分率。

 

結(jié)果計算與參考區(qū)間︰

溶血%=各管吸光值/100%溶血管吸光值×100

參考區(qū)間:50%溶血率4.0~4.45g/L

 

注意事項:

1、每次檢查應(yīng)設(shè)正常對照,正常對照與待測樣品氯化鈉濃度相差0.4g/L,即有診斷意義。2、 Parpart NaCl Solution采用高純度氯化鈉配制,不要被酸堿污染,同時注意密閉保存。3、血液樣品應(yīng)直接滴入液體,不宜沿管壁流入。

 

有效期12個月有效,常溫運(yùn)輸,4℃保存。

 

附錄:Parpart NaCI稀釋表

 

試管號

Parpart NaCI工作液(ml)

ddH2O(ml)

NaCI濃度(g/L)

1

4.0

0.0

10.0

2

3.6

0.4

9.0

3

3.4

0.6

8.5

4

3.2

0.8

8.0

5

3.0

1.0

7.5

6

2.8

1.2

7.0

7

2.6

1.4

6.5

8

2.4

1.6

6.0

9

2.2

1.8

5.5

10

2.0

2.0

5.0

11

1.8

2.2

4.5

12

1.6

2.4

4.0

13

1.4

2.6

3.5

14

1.2

2.8

3.0

15

1.0

3.0

2.5

16

0.8

3.2

2.0

17

0.4

3.6

1.0

 


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